腫瘤代謝 3D 模型怎么做？答題贏國潮文創(chuàng)福袋、鼠標(biāo)、京東卡等 150 份好禮

小李

我在細(xì)胞實(shí)驗上明明觀察到很明顯的代謝抑制，移植到小鼠身上后怎么完全沒效果？

你用的是不是 3D 模型？

師兄

師弟

啊？我用細(xì)胞鋪板，按照文獻(xiàn)里的方案做的，應(yīng)該沒問題吧……

2D 培養(yǎng)簡單高效，但回到真實(shí)腫瘤的缺氧、酸化環(huán)境，結(jié)論常常轉(zhuǎn)化無果。換成傳統(tǒng) 3D 模型，樣本小、信號弱，常規(guī)平臺靈敏度又測不出來。3D 模型選擇也有難度，如果不合適，輕則數(shù)據(jù)難解釋，重則推倒重來。

安捷倫 Seahorse XF Flex 平臺專為 3D 模型優(yōu)化了靈敏度和檢測范圍，下面這套 3D 模型工作流程，把每一步的關(guān)鍵都拆解清楚了，花 1 分鐘參與安捷倫 Seahorse 能量代謝學(xué)術(shù)營挑戰(zhàn)知識小測，看完你就知道怎么做了——答對還有機(jī)會贏取國潮文創(chuàng)福袋、Hp 內(nèi)膽鼠標(biāo)墊、鼠標(biāo)、文具套裝、京東卡、收納包等 150 份精美好禮！（答案都藏在文章里哦）

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常用 3D 模型如何選擇？

在開展代謝檢測之前，首先需要明確：所選模型是否恰當(dāng)？2D 貼壁培養(yǎng)雖具備操作簡便、通量高的優(yōu)點(diǎn)，但細(xì)胞平鋪于塑料表面，喪失了原始組織中的三維結(jié)構(gòu)及細(xì)胞間相互作用。相比之下，3D 模型能夠維持接近生理狀態(tài)的細(xì)胞形態(tài)、基質(zhì)相互作用以及物質(zhì)交換微環(huán)境，從而更真實(shí)地反映體內(nèi)的代謝特征與藥物響應(yīng)。目前常用的體外 3D 模型主要包括：

選對模型是獲取可用數(shù)據(jù)的第一步。在此基礎(chǔ)上，還需要合適的檢測工具及標(biāo)準(zhǔn)的工作流程，從而確保代謝信號測定的穩(wěn)定性與可重復(fù)性。

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安捷倫 XF 3D 應(yīng)用流程：從樣本到數(shù)據(jù)的整套方案

面對 3D 樣本代謝檢測的種種挑戰(zhàn)，安捷倫提供了一套完整的 XF 3D 應(yīng)用工作流程，從儀器平臺、專用耗材、檢測試劑到軟件分析，讓組織切片和類器官等模型的實(shí)時代謝分析變得可行。整個工作流程的核心包括四個環(huán)節(jié)：

專用分析儀：Seahorse XF Flex 分析儀是 24 孔平臺，專為 3D 樣本和代謝活性較高的細(xì)胞類型優(yōu)化了靈敏度和檢測范圍，兼顧 2D 細(xì)胞、懸浮細(xì)胞與 3D 模型的多重需求。

專用微孔板和捕獲環(huán)：XF Flex 3D Capture 微孔板-L 在每孔底部設(shè)計了固定尺寸的樣品倉，配合網(wǎng)格壓環(huán)將組織或類器官穩(wěn)穩(wěn)定位，消除位移帶來的信號干擾。

專用檢測試劑盒：XF 3D Mito Stress Test 試劑盒針對組織樣本優(yōu)化了抑制劑工作濃度，簡化了條件摸索過程，直接提供可用的實(shí)驗?zāi)０濉?/p>

智能軟件支持：Wave Pro Controller 內(nèi)嵌 3D 模板，自動計算 OCR/PER；Seahorse Analytics 提供歸一化、劑量-響應(yīng)分析和多文件對比，結(jié)果直接導(dǎo)出至 GraphPad Prism 等工具。

工具配齊了，真正上手時，很多新手都會在細(xì)節(jié)翻車——組織位移、氣泡殘留、信號衰減，這些問題即便借助高精度儀器也難以完全避免。下面這份避坑指南，梳理了實(shí)驗中最為常見的四個問題及應(yīng)對建議幫你提前避坑。

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避坑指南：4 個最容易忽視的細(xì)節(jié)

細(xì)節(jié)一：捕獲環(huán)安裝不當(dāng)或殘留氣泡，導(dǎo)致信號劇烈波動

常見原因為網(wǎng)格下方存在氣泡，或組織未被充分壓緊而發(fā)生位移

安裝捕獲環(huán)后，務(wù)必在明場成像下使用 4 倍鏡逐孔檢查，確認(rèn)網(wǎng)格緊貼孔底、組織居中且無氣泡殘留

細(xì)節(jié)二：OCR 持續(xù)下降，難以區(qū)分藥物效應(yīng)與組織活性衰退

檢測起始 O? 水平應(yīng)維持在約 152 mmHg，每個測量周期開始時需完全恢復(fù)，結(jié)束時不應(yīng)低于 40 mmHg

若 O? 恢復(fù)不足，通常提示組織量過大或緩沖液氧合不充分，需相應(yīng)調(diào)整組織尺寸或加強(qiáng)預(yù)充氧

細(xì)節(jié)三：重復(fù)實(shí)驗結(jié)果不一致，缺乏可靠的內(nèi)部對照

每板至少保留 3 個不加抑制劑的對照孔，否則各批次間缺乏可比性，數(shù)據(jù)解讀失去可靠基礎(chǔ)

細(xì)節(jié)四：pH 超出傳感器線性范圍，影響測量準(zhǔn)確性

XF 傳感器的pH線性檢測范圍為 7.4 ± 0.1 至 6.5 ± 0.1，超出該區(qū)間測量準(zhǔn)確度將顯著下降

檢測前需嚴(yán)格校準(zhǔn)緩沖液 pH；必要時在 FCCP 注射液中額外補(bǔ)充底物（如丙酮酸），以維持高呼吸負(fù)荷下的 pH 穩(wěn)定

代謝是細(xì)胞功能的核心，驅(qū)動能量產(chǎn)生，也調(diào)控生物合成、氧化還原平衡、線粒體功能和細(xì)胞命運(yùn)決定。當(dāng)代謝失衡，細(xì)胞功能隨之紊亂，疾病便悄然發(fā)生。通過實(shí)時功能性代謝分析，可以深入洞察細(xì)胞激活、增殖、分化和死亡背后的能量邏輯，從而揭示疾病機(jī)制。

無論你研究的是癌細(xì)胞的代謝逃逸、代謝疾病的能量失衡、神經(jīng)退行性病變中的線粒體損傷、干細(xì)胞分化的代謝開關(guān)，還是免疫細(xì)胞的活化與耗竭，安捷倫 Seahorse XF 平臺都能提供對應(yīng)的活細(xì)胞功能性代謝分析方案——從細(xì)胞線粒體壓力測試、底物氧化依賴性解析、實(shí)時 ATP 速率測定、糖酵解速率定量，到專為 3D 組織與類器官優(yōu)化的 XF Flex 高靈敏度檢測流程，助您在各自領(lǐng)域把代謝機(jī)制一層層拆解透徹。

內(nèi)容策劃：王丹琦

內(nèi)容審核：朱曉芳

題圖來源：圖蟲創(chuàng)意