當PCR儀的熒光信號開始躍動,數以億計的DNA舒展成待擴增的完美模板,在這場"魔法秀"中,用的為什么不是蒸餾水,而是2mol/L NaCl溶液?畢竟很多實驗中都要用到物美價廉的蒸餾水,為什么在這里就不適用呢?
01,為什么不是蒸餾水?
先來說說DNA緩沖液(buffer)的作用。溶解DNA只是最基本的一種作用,DNA可以溶解于很多溶液中,包括那些有機溶劑。但是,之所以選擇用緩沖液來保存而不是水,主要是防止DNA的降解。
![]()
DNA是帶電的高分子(否則你也無法跑電泳了),所以,對于帶電的物質,維持電荷穩定才是最關鍵的,否則就容易降解。
這就是為什么我們會選擇緩沖液來溶解DNA,因為緩沖液里有大量的電荷,且可以維持一個ph值較為穩定的范圍(ph和電的關系不需要解釋吧?)
02,緩沖液存在的意義
結合以上的內容,你應該知道,保存DNA,最關鍵的因素是
1,ph穩定(所以必須用緩沖液)
2,沒有DNA酶
符合以上條件的,且常用的,就是大名鼎鼎的TRIS-HCL緩沖液,成分是Tris(C4H11NO3),HCL。調整ph一般用的是NaOH和HCL。
而NaCl,就是上述緩沖液的一種成分(HCL+NaOH=NaCL+H2O)。當然,如果是短時間使用,且不需要保存的話,直接用水也沒任何問題。
![]()
最后,附上緩沖液的定義:當往某些溶液中加入一定量的酸和堿時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。英文名是buffer。這個名字,我覺得是生物試劑里最有趣的一個。
最后,buffer是一個很有用的東西,幾乎所有試驗都用得到。因為實驗的敏感性,如果不緩沖,你可能提不到東西或者提到一堆碎片
特別聲明:以上內容(如有圖片或視頻亦包括在內)為自媒體平臺“網易號”用戶上傳并發布,本平臺僅提供信息存儲服務。
Notice: The content above (including the pictures and videos if any) is uploaded and posted by a user of NetEase Hao, which is a social media platform and only provides information storage services.